Tes autoantibodi khas diabetes tipe 1

Keadaan utama ketika tes autoantibodi terhadap sel beta dianjurkan adalah skrining diabetes melitus tipe 1 yang tanpa gejala, pada orang dengan risiko yang tinggi. Yang dianggap berisiko tinggi adalah kerabat derajat pertama seorang pasien diabetes tipe 1, serta orang dengan risiko genetik yang tinggi. Salah satu contohnya adalah pembawa haplotipe HLA (antigen leukosit manusia) tertentu [1]. Keadaan lain yang sering dijumpai adalah memperjelas diagnosis pada orang dewasa dengan diabetes tipe 2, atau dengan diabetes yang tidak jelas. Kecurigaan diabetes tipe 1 muncul ketika ada ciri yang mengarah ke sana: usia yang muda saat diagnosis, penurunan berat badan tanpa disengaja, ketoasidosis saat manifestasi, atau cepatnya pengobatan antidiabetes ditingkatkan. Salah satu contoh peningkatan yang cepat adalah ditambahkannya insulin basal dalam 5 tahun pertama [2].

Karena insidens diabetes tipe 1 naik secara global, beberapa negara telah memperkenalkan program skrining penduduk:

• Italia — pada tahun 2023 mengesahkan undang-undang skrining nasional yang pertama untuk diabetes tipe 1 dan penyakit seliak pada anak berusia 1–17 tahun;
• Fr1da — di Bayern;
• GPPAD — di Eropa;
• Type1Screen — di Australia;
• TrialNet, ASK, dan CASCADE — di Amerika Serikat [3] [4].

Mengenali autoantibodi sejak dini memungkinkan edukasi tentang tanda-tanda penyakitnya dan pencegahan ketoasidosis pada saat manifestasi. Hal itu sekaligus membuka kemungkinan Anda ikut serta dalam penelitian klinis, atau bahkan akses pada terapi yang menunda perkembangannya, seperti teplizumab [4].

Kalau Anda mengidap diabetes tipe 1, risiko anak Anda mengalami penyakit ini jauh lebih besar dibandingkan penduduk umum. Karena itu tes autoantibodi berguna [5]. Pemeriksaannya dapat dimulai kapan saja pada masa kanak-kanak. Masa yang paling mungkin untuk menemukan serokonversi, yaitu munculnya autoantibodi yang pertama, berada di sekitar usia dua tahun dan pada usia 5–6 tahun. Pada masa itulah sebagian besar autoantibodi khas diabetes tipe 1 muncul [6].

Pada anak di bawah 3 tahun dianjurkan pemeriksaan setiap 6 bulan selama 3 tahun, lalu setiap tahun selama 3 tahun berikutnya. Pada anak berusia 3–18 tahun dianjurkan pemeriksaan setiap tahun [5]. Manfaat utama pemeriksaan dalam keluarga adalah pencegahan ketoasidosis pada saat manifestasi, sebab anak yang diperiksa lalu dipantau lebih jarang sampai dalam keadaan kritis pada saat diagnosis. Pemeriksaan dan pemantauan menurunkan risiko ketoasidosis, tetapi tidak menghapusnya sepenuhnya. Kalau pada anak muncul muntah, napas berat, atau rasa mengantuk, segeralah bawa dia ke unit gawat darurat. Keputusan untuk menjalani pemeriksaan diambil setelah pembicaraan yang saksama dengan dokter, sebab keputusan itu juga menuntut kesiapan batin keluarga menghadapi kemungkinan hasil yang positif [5].

Ada beberapa teknik laboratorium untuk mendeteksi keempat autoantibodi baku pada diabetes tipe 1:

• GADA — anti-dekarboksilase asam glutamat;
• IA-2A — anti-tirosin fosfatase 2;
• IAA — anti-insulin;
• ZnT8A — anti-transporter seng 8 [7].

Metode klasik, yang dipakai selama berpuluh tahun, adalah radioimunoanalisis (RIA), yang memakai penanda radioaktif, dan ELISA, yang bertumpu pada reaksi enzim yang menimbulkan warna [7].

Teknik yang lebih baru telah memperbaiki ketepatan dan keamanan pemeriksaannya. Elektrokemiluminesensi (ECL) dan luminescent immunoprecipitation system (LIPS) mendeteksi dengan kekhasan yang tinggi bahkan titer yang rendah, sehingga berguna terutama pada orang dewasa, yang sinyal autoimunnya dapat lebih lemah. Ada pula metode yang lebih unggul, jenis "bridge assay", yang memakai dua epitop untuk mengenali antibodinya, sehingga kekhasannya naik [8]. Hasil yang terbaik diperoleh di laboratorium yang ikut serta dalam Islet Autoantibody Standardization Program (IASP), yaitu program internasional yang secara berkala memeriksa kinerja metode yang dipakai [8].

Metode yang paling tepat adalah yang berkekhasan tinggi, seperti ECL (elektrokemiluminesensi) dan LIPS (luminescent immunoprecipitation system). ECL saat ini dianggap salah satu metode yang paling baik untuk mendeteksi autoantibodi dengan titer yang rendah. Metode itu berguna terutama pada orang dewasa yang dicurigai mengidap LADA, yang sinyal autoimunnya dapat lemah [8]. RIA tetap menjadi metode acuan yang bersejarah, tetapi penggunaan radioisotop membuatnya kurang praktis bagi laboratorium modern [7].

Apa pun teknologi yang dipakai, patokan yang paling penting adalah apakah laboratoriumnya ikut serta dalam Islet Autoantibody Standardization Program (IASP), yang secara berkala menilai kinerja pemeriksaannya dengan memakai bahan uji yang dibakukan [8]. ELISA dan metode dagang lain yang mutunya lebih rendah lebih terjangkau, baik dari segi biaya maupun dari segi kemudahan, dan dapat memberi hasil yang benar kalau laboratoriumnya sudah tervalidasi IASP. Pemeriksaan pertama yang positif harus dipastikan lewat pemeriksaan kedua dalam 3 bulan, idealnya di laboratorium bersertifikat IASP, sebab hasil yang lemah positif dapat bersifat sementara atau positif palsu [8].

IAA (autoantibodi anti-insulin) adalah antibodi yang ditujukan terhadap molekul insulin tubuh sendiri, yang dibuat oleh sistem imun bahkan sebelum sel beta rusak. Pada anak kecil, IAA sering menjadi autoantibodi yang pertama muncul [9]. Masalahnya muncul karena setiap insulin yang disuntikkan di bawah kulit dikenali tubuh sebagai protein asing, bahkan kalau yang dipakai insulin manusia yang sama persis dengan yang dibuat pankreas Anda. Dengan begitu, pada hari-hari atau minggu-minggu pertama pengobatan sering muncul antibodi terhadap insulin dari luar [7].

Karena itu, IAA hanya berguna pada orang yang belum pernah menerima insulin. Pada pasien diabetes tipe 1 yang sudah menjalani terapi insulin, hasil IAA yang positif tidak lagi bernilai untuk diagnosis. Pemeriksaannya tidak dapat membedakan apakah tanggapan autoimunnya ditujukan terhadap insulin tubuh sendiri atau terhadap insulin yang disuntikkan [7]. Dalam keadaan itu, dokter bertumpu pada autoantibodi yang lain (GADA, IA-2A, ZnT8A), yang tidak dipengaruhi oleh pengobatan insulin [9].

Hasil yang lemah positif berarti nilai yang berada sedikit di atas ambang positif yang ditetapkan laboratorium, tanpa titer yang jelas tinggi. Hasil semacam ini dapat mencerminkan autoimunitas yang sungguh ada pada tahap yang masih dini, gejala yang sementara, atau gangguan teknis pada metodenya. Gejala yang sementara muncul terutama pada anak kecil, yang sebagian pemeriksaan positifnya yang berdiri sendiri kembali negatif dalam beberapa bulan [10]. Karena itu dianjurkan memastikan setiap pemeriksaan yang positif lewat pemeriksaan kedua, dalam selang kira-kira tiga bulan [11].

Namun sikap praktisnya bergantung pada keadaan. Kalau Anda mempunyai gejala yang mengarah ke sana atau faktor risiko lain, dokter dapat memutuskan pemeriksaan tambahan. Pemeriksaan itu dapat berupa gula darah puasa, hemoglobin terglikasi (HbA1c), atau, yang lebih jarang, tes toleransi glukosa oral [11]. Kalau hasil yang lemah positif itu berdiri sendiri dan tidak terpastikan, pemantauan yang terus-menerus tetap diperlukan, sebab autoantibodinya dapat muncul di kemudian hari. Yang penting diingat: hasil yang lemah positif bukan berarti diagnosis diabetes tipe 1, melainkan hanya sinyal yang menuntut pengamatan dan penafsiran bersama dokter Anda, seperti yang ditunjukkan gambar di bawah [8].

Titer autoantibodi yang tinggi mencerminkan tanggapan imun yang kuat dan berkaitan dengan risiko yang lebih besar untuk berkembang menuju diabetes tipe 1 yang bergejala (stadium 3). Untuk setiap antibodi, laboratorium melaporkan bukan hanya positif atau tidaknya, melainkan juga nilai kuantitatif, yang memungkinkan risikonya dilapiskan [12]. Makin tinggi titernya, makin besar peluang autoantibodi itu menetap, bukan sekadar sementara [12].

Namun risiko perkembangannya bergantung bukan hanya pada titer, melainkan juga pada faktor lain:

• jumlah autoantibodi yang ada;
• kekhasannya — IA-2A dan ZnT8A berkaitan dengan perkembangan yang lebih cepat dibandingkan GADA yang berdiri sendiri;
• usia saat serokonversi — makin muda, makin besar risikonya;
• kehadiran faktor risiko genetik, seperti haplotipe HLA tertentu [1] [13].

Titer yang tinggi dari antibodi yang berkekhasan besar, misalnya IA-2A pada anak kecil, menunjukkan risiko yang bermakna dan membenarkan pemantauan metabolik yang lebih sering [13].

Ya. Gejalanya disebut serokonversi dan berarti munculnya autoantibodi yang pertama, yang sebelumnya tidak ada. Penelitian anak berskala besar, seperti TEDDY, BABYDIAB, dan DAISY, menunjukkan bahwa serokonversi dapat terjadi kapan saja pada masa kanak-kanak, dengan dua puncak utama. Satu muncul di sekitar usia 2 tahun, lebih sering untuk IAA, sedangkan yang lain di sekitar usia 5–6 tahun, lebih sering untuk GADA [6] [10]. Pada orang dewasa, serokonversi tetap mungkin, terutama dalam keadaan adanya penyakit autoimun lain [9].

Justru karena autoantibodi dapat muncul kapan saja, satu pemeriksaan yang negatif tidak menyingkirkan untuk selamanya risiko diabetes tipe 1 di kemudian hari, melainkan hanya menurunkannya. Pada orang dengan risiko yang tinggi — kerabat derajat pertama, faktor risiko genetik — hasil yang negatif harus diulang pada selang yang ditetapkan dokter [6]. Pendekatan ini memungkinkan serokonversi dikenali sedekat mungkin dengan saat terjadinya dan pemantauan metabolik yang terarah dimulai, sebelum penyakitnya menjadi bergejala.

Ya, ada tes skrining dari darah kapiler, yang diambil lewat satu tusukan sederhana di ujung jari, atau di tumit pada bayi. Berangkat dari tusukan yang sama, ada dua pilihan. Yang pertama adalah darah kapiler cair, yang dikumpulkan dalam tabung yang sangat halus lalu dikirim ke laboratorium. Yang kedua adalah pilihan "dried blood spot" (DBS): beberapa tetes diteteskan pada kartu kertas khusus, dibiarkan mengering, lalu dikirim [14]. Beberapa program internasional memakai metode ini, seperti Fr1da di Bayern (darah kapiler cair), T1Detect (DBS), dan Type1Screen (DBS, di Australia) [15].

Keuntungan utama pemeriksaan kapiler adalah kemudahan menjangkaunya. Pemeriksaan itu dapat dilakukan di tempat praktik dokter keluarga atau bahkan di rumah, dengan satu tusukan kecil alih-alih pengambilan darah dari pembuluh balik, dan dengan biaya yang lebih rendah. Dengan begitu lebih banyak anak dapat diperiksa [15]. Keterbatasannya, setiap hasil yang positif harus dipastikan lewat pemeriksaan kedua, yang diambil sebagai bahan uji dari pembuluh balik, di laboratorium yang mematuhi standar IASP. Tes kapiler dapat memberi hasil yang lemah positif atau positif palsu [14]. Kalau hasilnya terpastikan, menyusul penilaian metabolik yang lengkap untuk menetapkan stadium diabetes tipe 1.